间充质间质细胞特性
提供合约化验服务
人多能间充质基质细胞（MSCs，也称为间充质干细胞）是一种异质粘附的成纤维细胞样细胞，可以自我更新并在培养中分化为骨、脂肪和软骨组织。近年来，人们对间充质干细胞及其在组织工程和修复中的潜在治疗应用越来越感兴趣。
间充质干细胞的表型可以随组织来源和细胞分离和培养程序的任何差异而变化。这种表型变异性强调了表征间充质干细胞的重要性，例如通过评估其扩展和分化的能力，以及它们的免疫调节能力。在考虑骨髓间充质干细胞的治疗应用（如细胞治疗）时，表征尤为重要。
获得及时和相关的数据，为您的MSC研究与合作合约化验服务（CAS）． 浏览下面的内容或联系我们，了解我们如何使用我们的MSC特性分析套件来帮助评估您的MSC细胞群。
MSC生长表征
定量评估您的MSC样本的增殖和倍增率使用我们的增殖试验。在该实验中，MSCs在无动物成分的培养基中扩增8代，然后评估其生长或倍增时间。
使用CAS的MSC生长表征服务：
- 使用specialized扩展MSCsMesenCult™媒介
- 评估每段中MSCs的数量
- 计算扩增后的MSCs加倍率
图1所示。人骨髓来源的间充质干细胞在MesenCult™培养基中扩增
(A)人骨髓（BM）来源的间充质干细胞在MesenCult™-ACF培养基中扩增。(B) 8代培养的两种人脑源性MSCs的细胞扩增累积时间约为1.2天。倍增率= N / (log2 (C2 / C1))，其中N =培养总天数，C1 =细胞初始浓度，C2 =细胞终浓度
表面标记表征
MSCs可以通过流式细胞术使用针对细胞表面标记物的荧光染料偶联抗体来表征。探索我们可定制的流式细胞仪面板，了解我们如何帮助您评估新鲜解冻细胞样本中MSCs的纯度。
表1。阴性和阳性骨髓源性间充质干细胞流式细胞术标记面板
标准委员会
图2。流式细胞术表征MSCs的表型
人脑基干细胞的流式细胞术分析。用抗体对阳性和阴性间充质干细胞标记物（橙色线）或同型对照（灰色线）进行染色。排除死亡（7-AAD+）细胞，并根据MSCs的光散射特性对细胞进行门控。
体外MSC分化实验
使用我们的体外分化测试套件来评估MSCs的分化潜力。无论是将MSCs分化为脂肪细胞、骨细胞还是软骨细胞，您都可以通过与我们的内部专家合作，提高工作流程的效率，满足您的检测需求。了解更多关于我们的服务产品如下。
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脂肪生成分化试验： CAS用途MesenCult™成脂分化培养基（人）培养和分化你的间充质干细胞样本到成脂谱系。油红O染色显示分化，检测脂肪生成细胞中脂质的存在。从培养物中提取染料以量化成脂分化的水平。
图3。强健的骨髓间充质干细胞成脂分化
(A)未分化（阴性对照）和(B)分化的MSC培养分别在MesenCult™-ACF培养基和MesenCult™Adipogenic Differentiation medium （Human）中保持相同的时间。未分化的间充质干细胞培养显示不存在脂质。在诱导后的14天内观察到脂肪形成分化，显示出强烈的脂质存在（油红O染色）。
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成骨分化试验： CAS用途MesenCult™成骨分化试剂盒（人）培养骨髓间充质干细胞并将其分化为成骨谱系。在成骨细胞矿化过程中，通过茜素红染色可见分化。从培养物中提取染料来量化成骨分化的水平。成骨分化在14 - 21天完成。
图4。强健的骨髓间充质成骨分化
(A)未分化（阴性对照）和(B)分化的MSC培养分别在MesenCult™-ACF培养基和MesenCult™成骨分化培养基（人）中保持相同的时间。未分化的间充质干细胞培养未见钙沉积。强钙（茜素红S）染色显示，诱导14天内观察到成骨分化。
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软骨分化试验： CAS不含动物成分MesenCult™-ACF软骨分化培养基培养和分化你的MSC样本成软骨细胞谱系。骨软骨的分化和形成是通过阿利新蓝可视化的，它可以检测软骨基质内的聚集蛋白。
图5。骨髓间质干细胞衍生软骨细胞小球的组织学研究
(A)未分化和(B)分化的间充质干细胞分别保存在MesenCult™-ACF培养基和MesenCult™软骨分化培养基中。第21天，固定细胞颗粒样品，石蜡包埋，切片，并用阿利新蓝染色，检测软骨基质内的聚集蛋白。核快红被用作核反着色剂。
MSC T细胞抑制实验
间充质干细胞具有显著的免疫调节特性，这使它们成为细胞治疗的理想候选者。可以在体外共培养中观察到MSCs调节各种免疫细胞类型反应的能力。
使用我们的抑制实验评估MSC样本的免疫抑制功能，其中CD4+T细胞在MSCs的存在下被刺激增殖4 - 5天。刺激后，流式细胞术检测应答细胞增殖情况。图6显示了该分析的数据示例。
图6。MSC对CD4的抑制作用+T细胞增殖
人脑梗死来源的间充质干细胞能够抑制CD4+T细胞以剂量依赖的方式增殖。作为背景对照，应答细胞以2倍的细胞浓度培养，以确定在与1:2 MSC：应答细胞培养相同数量的总细胞存在下的基线抑制。
样品需求
送往STEMCELL进行检测服务的人类生物样本必须按照当地和联邦要求收集，并附有适当的捐赠者知情同意书和机构审查委员会批准文件。这些样本必须来自传染病筛查阴性的捐赠者，包括但不限于艾滋病毒、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒。测试文件必须根据要求提供给STEMCELL。对于经过进一步处理的人类生物材料，必须提供证明其无支原体状态的文件。
